Возможно ли преодолеть старение? Сегодня и завтра клеточной терапии - страница 5

Некоторые специалисты пришли к заключению, что лечение морщин с помощью аутологичных фибробластов является наименее трудоемким и наиболее эффективным методом коррекции морщин в клинической практике. Этот метод представляется единственным, эффективно убирающим рубцовые изменения после угревой сыпи (Рис. 13а и 13б). По данным доктора Арнольда Клейна (США) эффективность метода достигает 95%.

Основные свойства фибробластов сохраняются при культивировании их вне организма. Эти клетки:

– сохраняют диплоидный кариотип в течение жизни;

– имеют ограниченную продолжительность жизни;

– обладают свойством контактного торможения делений и требуют прикрепления к субстрату (дну культурального флакона) для пролиферации;

– у клеток отсутствует онкогенная потенция, т.е. имеется безопасность применения аутологичных фибробластов (Келлер и др., 2000),

– отсутствуют опухоли у бестимусных мышей через 2 мес. после введения 40 млн. клеток;

– имеют нормальную сократительную способность в отношении коллагена;

– сохраняют активный синтез коллагена I типа после культивирования in vitro в течение 6 пассажей.

В одной из фирм США утверждается, что ими выполнены уже тысячи подобных процедур, пролечены тысячи пациентов. С помощью подобных методик в косметологии исправляют возрастные изменения кожи лица, морщины, рубцы кожи. Применение собственных клеток оправдано тем, что отсутствует реакция отторжения, часто возникающая при использовании клеток других людей, как эмбриональных, так и тем более полученных от взрослых доноров. Кроме того, нет этических проблем, возникающих при использовании эмбриональных клеток.

Примеры применения методик показаны также на других рисунках. Так, на рис. 14а, 14б и 14в показан вид лица пациентки с носогубной складкой (морщина) до процедуры применения аутогенных фибробластов (Рис. 14а), во время клеточной терапии (Рис. 14б) и спустя 6 месяцев после (Рис. 14в). Хорошо видно, что морщина значительно уменьшилась (разгладилась) и практически исчезла. Это произошло за счет того, что введенные аутогенные фибробласты прижились и начали вырабатывать новый, молодой коллаген и эластин.

На других рисунках (Рис. 15а и 15б) можно видеть часть участка лица пациентки до процедуры введения аутогенных фибробластов (Рис. 15а) и спустя 4—6 месяцев после выполнения терапии (Рис. 15б). Стрелкой показан дефект кожи до терапии и после. Дефект – рубцовая поверхность на щеке после удаления бородавки (Watson et al., 1999).

Возможны исправления иных подобных старческих изменений кожи (Weiss et al., 2007).

КРИОХРАНИЛИЩЕ

После применения клеточной терапии часть клеток может оказаться неиспользованной. Эти клетки следует сохранить для того, чтобы повторять процедуры в отдаленном будущем.

Для сохранения собственных клеток необходимо поместить их в специальное криохранилище. Оно представляет собой дюралюминиевую или стальную емкость, выполненную по типу термоса, с двойными стенками, между которыми создается вакуум. В неё заливается жидкий азот, имеющий температуру минус 196^>0С (Рис. 16а и 16б).

Перед замораживанием клетки отмывают от ростовой среды и выдерживают в защитном растворе, который предотвращает их от повреждения при низкой температуре. Затем суспензию клеток заливают в специальные стерильные пластмассовые ампулы, закрывающиеся герметично. Эти ампулы с клетками внутри вначале подвергаются постепенному плавному охлаждению до минус 70—80