СТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ХРОМОСОМ И ДИФФЕРЕНЦИРОВКА КЛЕТОК КРОВИ. STRUCTURAL ORGANIZATION OF CHROMOSOMES AND BLOOD CELL DIFFERENTIATION - страница 4



Сравнение структурной организации хромосом в наборах из культуры крови и костного мозга показало, что три типа хромосомных наборов образуются только в костном мозге, где происходит дифференцировка и образование лейкоцитов, эритроцитов и мегакариоцитов.

У каждой особи при одинаковом общем числе хромосом 42 были обнаружены три разновидности хромосомных наборов или три типа. Они отличаются количеством метацентрических и акроцентрических хромосом. Тип I включал 26 акроцентрических и 14 метацентрических, тип II соответственно – 24 и 16 и тип III – 22 и 18, и в каждом из типов имелась также одна пара самых больших субтелоцентрических аутосом.

Устойчивые и повторяющиеся преобразования морфологической структуры у 18 и 19 пар метафазных хромосом в маркерах трех ростков крови свидетельствуют о неизвестном ранее способе реализации генома стволовых клеток. Вероятно, это осуществляется при упаковке ДНК специфично в разных по физиологии клетках крови для выполнения специализированных функций.

Кроме того, интенсивность образования трех типов хромосомных наборов – маркеров трех рядов кроветворных клеток существенно различалась на этапах онтогенеза и при воздействии на организм факторов различной природы и силы, которые вызывали неодинаковые физиологические состояния и адекватно им соответствующую интенсивность образования этих маркеров.

Следовательно, открыто новое явление о качестве материи в виде трех типов хромосомных наборов в популяции костного мозга у каждого субъекта. Кроме того, обнаружены определенные количественные закономерности в их образовании, которые осуществляются специфично при различных воздействиях на организм и состоянии физиологии. При этом определены математические и функциональные зависимости, что дает возможность более точно оценивать состояние физиологии организма при разных воздействиях и, таким образом, решать вопросы на новых уровнях по проблеме здоровья человека.

Глава 2

Объекты и методы исследования

2.1. Объекты исследования

В качестве объектов исследования использовали из вида Rattus norvegicus лабораторных белых крыс линий Август, Вистар и беспородных обоего пола из питомников «Столбовая» и «Белый мох» (рис.1), а также серых диких крыс самцов. Всего на изучение различных моделей израсходовано около 500 животных.



Рис. 1. Белая крыса (Rattus norvegicus) – объект цитогенетических исследований структурно-функциональных преобразований хромосом

на уровне популяции клеток костного мозга


В основу исследования положено изучение структурного полиморфизма хромосом в популяции кроветворных клеток костного мозга у интактных животных разного возраста и экспериментальных моделей различной физиологии. На беспородных крысах воспроизводили модели трех разных уровней кроветворения: мегакариоцитопоэза, лейкопоэза, эритропоэза и другие патофизиологические состояния.

2.2. Воспроизведение моделей костномозгового кроветворения

Модель спленэктомии у крыс выполняли под наркозом. Для этого животным вводили внутрибрюшинно короткой иглой в области около средней линии живота и ближе к задней конечности тиопентал натрия из расчета 4 мг на 100 г массы. Операцию выполняли в соответствии с разработанными правилами (Островерхов Г. Е., Лубоцкий Д. Н., Бомаш Ю. М., 1972). Перед операцией животных фиксировали в целях обездвиживания в специальных станках спиной вниз за лапы и зубы и остригали шерстъ в области левого подреберья. Косой разрез делали параллельно левому реберному краю через кожу, мышцы и брюшину. Через вскрытую рану выводили селезенку, перевязывали кровеносные сосуды и затем селезенку отрезали. Рану ушивали наглухо через все слои брюшной стенки, под кожу вносили антисептик.