Интерпретация результатов лабораторных исследований - страница 14

Заключение. В 2023 году наибольшее количество неудовлетворительных результатов было получено участниками МСИ «ФСВОК» при определении волчаночного антикоагулянта в слабоположительных образцах. Основным источником ошибок участников стало неверное следование алгоритму проведения исследования.

Актуальность. Среди важных факторов риска развития возрастной макулярной дегенерации (ВМД) – одной из главных причин слабовидения и слепоты у пациентов пожилого возраста, особое место отводят нарушениям гемодинамики, обусловленным эндотелиальной дисфункцией. Изучение воспалительных маркеров активации эндотелия представляется актуальным для понимания механизмов развития ВМД, подходов к разработке патогенетически ориентированной терапии на ранних стадиях заболевания, вторичной профилактики осложнений.

Цель: сравнительный анализ уровней растворимых молекул адгезии sE-selectin, sP-selectin, sICAM-1, sVCAM-1 и хемокина МСР-1/CCL2 в слезной жидкости (СЖ) и сыворотке крови (СК) пациентов с начальной и промежуточной стадиями ВМД.

Иммунологические исследования выполнены в тест-пробах 58 больных, распределенных, согласно клинической классификации AREDS, на три группы: 26 человек с ранней ВМД (I группа – AREDS2), 14 пациентов с промежуточной стадией заболевания (II группа – AREDS3) и 18 здоровых доноров пожилого возраста (контроль = группа риска – AREDS1). Обработано 116 образцов СК и СЖ. В исследовании применен метод проточной цитометрии (лазерный проточный цитофлуориметр BD FACS Canto II, США) с использованием мультиплексной панели, собранной из совместимых симплексных тест-систем Flow Cytomix^>TM (Bender MedSystem GmbH, Германия) для определения sICAM-1, sVCAM-1, sE-selectin, sP-selectin и МСР-1/CCL2, позволяющей осуществлять их одновременное определение в пробе. Обработка данных осуществлялась в пакете FlowCytomix Pro v 6.0 (BenderMed Systems GmbH, Германия). Оценку результатов выполняли с учетом пределов чувствительности для каждого аналита. Статистический анализ выполняли с использованием Statistica 12.0 (Stat Soft Inc., USA).

В СЖ пациентов с ВМД обнаружено увеличение содержания селектинов по сравнению с группой риска: в СЖ группы AREDS2 концентрация sE-selectin составила 34,4 нг/мл: величина этого параметра практически в 4 раза превосходила таковую в норме (р < 0,05). В ходе анализа локальной продукции sP-selectin при начальной ВМД обнаружена тенденция к повышению уровня этого селектина практически в 2 раза (до 28,9 нг/мл против контроля – 14,1 нг/мл). Более выраженные сдвиги, со значимым ростом содержания sP-selectin в СЖ, отмечались и в группе AREDS3 (р < 0,05). Достоверной разницы в локальной продукции селектинов между группами с ВМД не обнаружено; однако диапазоны их концентраций (от минимума к максимуму) отличались: в СЖ пациентов с начальной ВМД разброс определенных в данной группе показателей sE- и sP-selectin был намного шире. При анализе содержания селектинов в СК не выявлено достоверных сдвигов относительно таковых у здоровых доноров. Повышение локального уровня MCP-1/CCL2 в группе AREDS2 до 491 пг/мл скорее всего явилось результатом вклада множества клеток: в пользу этого свидетельствовал широкий размах значений показателя; содержание этого цитокина в СК пациентов обеих клинических групп находилось в пределах возрастной нормы. В ходе работы обнаружена тенденция к усилению локальной продукции sICAM-1 (в СЖ) на стадии AREDS2 относительно контроля и значительное увеличение концентрации изучаемого белка в СЖ пациентов с промежуточной ВМД, в 3 раза превышающей таковую в группе риска (р < 0,05). Анализ не выявил статистически значимых различий в локальных концентрациях sICAM-1 в основных группах, но пределы диапазонов изменений данного показателя (от минимума к максимуму) отличались: в СЖ пациентов с начальной ВМД размах значений sICAM-1 был намного шире. Тенденция к повышению концентрации sVCAM-1 в СК пациентов группы AREDS3 позволяет думать о подключении системных механизмов активации эндотелия на продвинутых стадиях заболевания. Для определения возможной диагностической ценности определения в СЖ sE-, sP-selectin, МСР-1/CCL2 и sICAM-1 был проведен ROC-анализ, на основании которого были выделены потенциальные локальные биомаркеры сосудистой активации при ранней ВМД: AUC для sE-selectin составила 0,817 (p = 0,001), для MCP-1 / CCL2 – 0,813 (p = 0,009), для sICAM-1 – 1,0 (p < 0,001).